埃布斯坦综合征的诊断，临床症状和体征固然可能给予重要提示，但要作出准确诊断尚有赖于下述各项辅助检查，尤其是选择性心血管造影术。
1.心电图 P波振幅增高及(或)增宽，有时可见切迹，以Ⅱ，Ⅲ，aVF以及V1导联最为清楚，有人认为P波改变的程度与预后有关，P波正常者常无症状;显著异常者，不但常有症状而且极易在短期内迅速死亡，P-R间期常延长，完全性或不完全性右束支传导阻滞几乎见于每一病人，肢体导联及右胸导联常有低电压，右心室肥厚偶见，但绝无左心室肥厚的图形。
近有人指出Vl～4导联的QRS波群呈Qr型并伴有T波倒置，是本畸形一种特异性心电图变化。
该畸形病人约有5%～25%合并预激综合征(B型)，先天性心脏病合并预激综合征者，其中30%为Ebstein畸形，因此，在临床上，当先天性心脏病合并预激综合征时，应疑及Ebstein畸形之可能，这种畸形可发生各种心律失常，其中阵发性室上性心动过速常见，即使无预激综合征也是如此，其他心律失常如房性期前收缩，心房扑动或心房颤动等均可见。
2.X线检查 轻度畸形者，心脏扩大不明显，肺血正常，中，重度畸形者，心脏向两侧扩大，主要为右心房扩大，透视下心缘搏动不明显，与扩大的心脏很不相称，类似于心包积液或肺动脉口狭窄伴心力衰竭的X线征象，由于右心房扩大，加上右心室流出道向左移位，心影可呈方盒形或漏斗形，少数病变可呈球形，肺血减少，主动脉结正常或偏小。
3.超声心动图 最典型的表现是三尖瓣前叶活动振幅增加，同时又有关闭延迟(至少要在二尖瓣关闭后0.04s才关闭)，此外，如果将探头放在一般显示右心室的部位，可见巨大心腔(房化的右心室)，还可见到三尖瓣的EF斜率(舒张早期的关闭运动)减慢。
4.右心导管检查 以往认为埃布斯坦综合征作心导管检查危险性极大，易发生严重的心律失常，甚至危及生命，因此，若不考虑心脏矫治术，最好不作此检查，现在认为，若临床诊断不明时，尽管有危险仍应进行，在有经验人员操作及有抢救设备条件下，危险不大，一组国际合作研究本畸形患者共505例，行导管检查及造影共363例，发生心律失常者100例，其中死亡13例。
右心导管检查时，导管常盘绕在扩大的右心房内，操纵导管，往往可将导管尖送入左心房(通过心房间交通)，但却难于进入右心室。
右心房内压力较高，右心房压力曲线示a波，v波增大，右心室舒张压高，收缩压正常或稍高，肺动脉压正常或偏低，当从肺动脉到右心室，或从右心室到右心房回抽导管，并连续记录压力曲线时，可发现肺动脉瓣两侧有收缩压差，三尖瓣两侧有舒张压差。
多数病人，在心房水平有右至左分流，偶可发现该水平有左至右分流。
这里应特别提到的是，如能同时记录压力曲线和心腔内心电图，常可发现在右心房与功能性右心室之间有一移行区(图1)，该区所录得的压力同右心房，而腔内心电图图形同右心室，这个移行区即为房化了的右心室，这一发现，常有助于埃布斯坦综合征的诊断。
5.选择性右心系统造影 该畸形造影诊断的主要依据是：三尖瓣畸形，下移和右心室房化，一般于显影的右心房室下缘可见两个切迹，其一在脊柱中线附近，为固有的三尖瓣环;其二位于脊柱左侧，为下移之三尖瓣的反映，两个切迹之间即为房化的右心室，另外，选择性右心房造影，尚可发现右心房明显扩张，造影剂通过缓慢;左心房，左心室，主动脉早期显影(有心房间交通时)，选择性右心室造影，还可发现三尖瓣反流，右心室流出道狭窄或扩张。
