阴沟肠杆菌是肠杆菌科肠杆菌属的成员之一,该菌为革兰阴性粗短杆菌,宽约0.6~1.1μm,长约1.2~3.0μm,有周身鞭毛(6~8条鞭毛),动力阳性,无芽孢,无荚膜,其最适生长温度为30℃,兼性厌氧,在普通培养基上就能生长,形成大而湿润的黏液状菌落,在血琼脂上不溶血,在伊红-亚甲蓝琼脂(EMB)为粉红色且呈黏稠状,在麦康凯(MacConkey)琼脂上为粉红色或红色,呈黏稠状,在SS琼脂上若生长则呈白色或乳白色,不透明黏稠状,在糖类发酵中:乳糖,蔗糖,山梨醇,棉子糖,鼠李糖,蜜二糖均阳性,不能产生黄色色素,鸟氨酸脱羧酶试验(+),精氨酸双水解酶试验(+),赖氨酸脱羧酶试验(-),吲哚(-),阴沟肠杆菌具有O,H和K三种抗原成分,大多数菌株的培养物煮沸100℃ 1h后能强烈地与同源O血清发生凝集,而活菌与其凝集微弱或不凝集,表明具有一个K抗原,在O血清中不凝集的活菌培养物在经100℃加热1h,菌悬液经50%乙醇或1mol盐酸处理,37℃18h变为可凝集,但在60℃加热1h后仍不失其O不凝集性,用煮沸加热的菌悬液制备的抗血清不含有K凝集素,由阪崎建立的阴沟肠杆菌抗原表由53个O抗原群,56个H抗原及79个血清型所组成。
①O抗原:玻片凝集试验是测定阴沟肠杆菌的常规方法,过夜琼脂培养物的浓盐水菌液,加热100℃1h,用离心法洗涤,与稀释的O血清用于凝集,虽然血清的效价在500~1000,但仍以1∶10稀释用于玻片凝集,较好的是使用更高稀释度的抗血清,在数秒内能发生强反应,而交叉反应更少一些,在不同O抗原间可观察到迟缓和单边反应,虽然大多数O抗原群能用适度稀释的未吸收血清进行测定,但经常需要使用吸收的群特异血清测定特异O抗原。
②H抗原:测定H抗原,常规方法是试管凝集试验,使用动力活泼的过夜肉汤培养物,培养基以含有0.2%葡萄糖的胰酶大豆肉汤和浸液肉汤,培养后在肉汤培养物中加入等量的0.6%甲醛盐水,未吸收的本菌效价10000~20000的血清通常稀释1∶1000,1∶100稀释的H血清0.1ml置于一小试管中,然后加入甲醛溶液1.0ml处理的肉汤培养物,试验小管在50℃水浴1~2h后读取结果,阴沟肠杆菌的菌属内,外抗原关系:虽然在肠杆菌属内有多个种,阴沟肠杆菌是惟一对其进行抗原研究的,因此在阴沟肠杆菌与其他肠杆菌属种间的抗原关系目前尚不清楚,以往曾报道过,大多数阴沟肠杆菌是可用克雷伯氏菌荚膜血清分型的,阪崎的研究证明阴沟肠杆菌产生的黏液不是真正的荚膜,在克雷伯氏菌和阴沟肠杆菌间没有明显的O抗原和K抗原关系。
发病机制
作为革兰阴性细菌,内毒素起着致病作用,除此之外,该菌对消毒剂及抗生素有强烈的抵抗能力,这是渐增多的医院感染的重要因素,其原因是它能很快获得对抗生素,尤其是对β-内酰胺类抗生素的耐药性,应引起临床医师的重视。
1.宿主防御功能减退
(1)局部防御屏障受损:烧伤,创伤,手术,某些介入性操作造成皮肤,黏膜的损伤,使阴沟肠杆菌易于透过人体屏障而入侵。
(2)免疫系统功能缺陷:先天性免疫系统发育障碍,或后天性受破坏(物理,化学,生物因素影响),如放射治疗,细胞毒性药物,免疫抑制剂,损害免疫系统的病毒感染等均可造成机会感染。
2.为病原体侵袭提供了机会 各种手术,留置导尿管,静脉穿刺导管,内镜检查,机械通气等的应用使得阴沟肠杆菌有了入侵机体的通路,从而可能导致感染。
3.阴沟肠杆菌产生β-内酰胺酶 阴沟肠杆菌既可产生ESBIs,又可产生Amp C酶,导致其对多种抗生素高度耐药,给临床治疗带来困难,浙江省144株阴沟肠杆菌的药敏检测显示对阿莫西林-克拉维酸,头孢呋辛,氨曲南,头孢噻肟,环丙沙星,哌拉西林-他唑巴坦和阿米卡星的敏感率均在55%以下,对头孢哌酮-舒巴坦,头孢吡肟敏感率也只有60%左右,仅对亚胺培南的敏感率高达98.61%,其中高产Amp C酶菌株占24.31%,产ESBLs菌株占36.81%。
4.抗生素的广泛应用
(1)广谱抗菌药物可抑制人体各部的正常菌群,造成菌群失调。
(2)对抗生素敏感的菌株被抑制,使耐药菌株大量繁殖,容易造成医院感染细菌的传播和引起患者发病,近年来由于第三代头孢菌素的广泛使用,容易筛选出高产Amp C酶的阴沟肠杆菌,导致耐药菌的流行。