确诊有赖于组织学活检(包括免疫组化检查及分子细胞遗传学检查)，不仅可确诊，还可做出分型诊断，这对了解该病的恶性程度，估计预后及做出正确的治疗方案都至关重要。
正确处理和固定活检物质对于正确诊断十分重要，正确处理活检物质可以做一系列补充检查，特别是免疫表型分析，细胞基因学分析，融合蛋白的分子学检查及免疫球蛋白形式和TCR基因重排检查，对正确诊断起辅助作用，首要原则是尽可能少使用侵入性操作过程，有胸腔积液者行胸穿进行细胞学检查和免疫学检查，经常可以在数小时内提供诊断，如果骨穿结果正常及没有早期可以得到的积液，可以选择纵隔外淋巴结进行活检，如果可以取到的外周淋巴结活检结果阴性，则可以在局麻下行胸骨旁纵隔切开术，也可以在X线指导下行纵隔肿块的针刺活检或针刺抽吸。
以浅部淋巴结肿大发病者，活检可以确诊，关键是对一些无痛性淋巴结肿大者要提高警惕，而原发于深部淋巴结者，则易漏诊，故对长期发热原因不明者，如怀疑为NHL应进行手术探查。
腹部巨大淋巴瘤患者由于代谢紊乱和肾功能异常，特别是快速生长的伯基特淋巴瘤，也给诊断带来了困难，腹水经常包含有大量恶性肿瘤细胞，正确的细胞学检查结合免疫表型检查可以提供一个快速的诊断，而使患者免去了剖腹探查术和全麻的额外风险。
HL的诊断应包括分期鉴别诊断，确定分期后才能使病人接受合理的治疗，国际上有几个分期系统较为常用，本文介绍St.Jude分期，这一分期系统源于Ann Arbor霍奇金淋巴瘤分期系统。
