1.血生化检查：测定血钙，磷，碱性磷酸酶，血清25-(OH)D3(正常10～80μg/L)和1,25-(OH)2D3(正常0.03～0.06μg/L)在佝偻病活动早期就明显降低，为可靠的早期诊断指标，血浆中碱性磷酸酶升高。
2.尿钙测定：尿钙测定也有助于佝偻病的诊断，尿中碱性磷酸酶的排泄量增高。
3.长骨骨骺端X线摄片：发现长骨骨骺端佝偻病的特异X线表现，早期X线长骨骺部钙化预备线模糊;极期钙化预备线消失，骨骺端增宽，骺端呈杯状或毛刷状改变，骨质稀疏，骨干弯曲变形或骨折。
4.X线骨龄摄片：发现骨龄落后。
