1.实验室检查
(1)周围血象:急性期白细胞常稍低或正常,淋巴细胞相对增多,偶可有异常淋巴细胞,但一般不超过10%,慢性肝炎白细胞常减少,急性重症肝炎则白细胞总数及中性粒细胞百分比均可显著增加,部分慢性肝炎患者中血小板可减少。
(2)肝功能试验:①血清酶测定:血清酶的种类繁多,主要检查反映肝实质损害的酶类,根据国内经验丙氨酸转移酶(ALT),羧门冬氨酸转移酶(AST)更灵敏,应用也更广泛,虽然其特异性不强,但如能除外其他引起升高的因素,特别是当数值很高(大于正常值10倍以上),持续时间较长时,对肝炎的诊断价值很大,AST有2种,一种是位于细胞质的ASTs,另一种为ASTm,存在于肝细胞线粒体中,重症肝炎时以ASTm增加为主,由于ASTm的半衰期短于ASTs,故恢复也较早,急性肝炎中ASTm持续升高时,有转变为慢性肝炎可能,慢性肝炎中ASTm持续增多者,应考虑为慢性活动性肝炎,也有人认为ALT/AST比值对于鉴别诊断有一定意义,病毒性肝炎时比值为0.56,梗阻性黄疸时为1.03,正常人为1.15,谷胱甘肽-S-转移酶(GST)在重症肝炎时升高最早,有助于早期诊断,果糖1,6二磷酸酶是糖原合成酶之一,各型慢性肝炎血清含量明显升高。②其他:凝血酶原时间及其活动度的测定可用于判定重症肝炎,如注射维生素K后仍明显异常,常表示肝细胞组织严重受损,预后不良,此外如胆固醇,胆固醇酯明显降低,亦常提示预后不良,血氨测定有助于肝性脑病的诊断。
2.血清学及病原学检测
(1)甲型肝炎:①病原学检查:在潜伏期后期和急性早期,可检测到HAV病毒与抗原,可使用免疫电镜检测HAV颗粒,或用CDNA-RNA分子杂交技术和聚合酶链反应(PCR)检测HAVRNA,用放射免疫(RIA)和酶免疫(EIA)检测HAAg。②血清学检查:测定抗HAV抗体,常用RIA和EIA法,可分别测定抗HAV IgG和IgG抗体,抗HAV-IgM急性期患者发病第1周即可阳性,1~2个月抗体滴度和阳性率下降,于3~6个月后消失,因此对早期诊断十分重要,特异性高,HAV-IgG在急性期后期和恢复早期出现,持续数年或以上,主要用于了解过去感染情况及人群中免疫水平,对流行病学调查更有意义。
(2)乙型肝炎:①HBV抗原-抗体的测定:人体感染HBV后,血液中可出现一系列的HBV有关的血清学标志,可作为临床诊断和流行病学调查的指标,常用的标志有HBsAg、HBeAg和HBeAg及其抗体系统,测定方法以RIA和EIA为最灵敏。A.HBsAg与抗-HBs的检测:HBsAg阳性是HBV感染的特异性标志,其滴定度随病情恢复而下降,慢性肝炎,无症状携带者可长期检出HBsAg,但HBsAg的滴度与病情无平行关系,HBsAg为病毒表面外壳,无传染性,血清中抗-HBs阳性,提示有过HBV感染,它是一种保护性抗体,血清中出现阳性表示机体有免疫力,不易再次得乙型肝炎,此外乙型肝炎预防接种后,检测抗-HBs是评价疫苗效果的重要标志之一。B.HBeAg与抗-HBe的检测:由于HBeAg是核心抗原的成分,其阳性和滴度常反映HBV的复制及判断传染性的强弱,急性乙肝时HBeAg呈短暂阳性,如持续阳性提示转为慢性,在慢性HBV感染时,HBeAg阳性常表示肝细胞内有HBV活动性复制;当HBeAg转阴,伴抗HBe转阳常表示HBV复制停止,抗HBe出现于急性乙肝的恢复期,可持续较长时期,抗-HBe的出现意味着血清中Dane颗粒少或无,传染性低。C.HBcAg与抗-HBc的检测:应用电镜和免疫酶染色技术可检出肝细胞核内的HBcAg,一般认为血清内无游离的HBcAg,故不能直接从血清中测定HBcAg,但可从血中找Dane颗粒,用去垢剂脱去Dane颗粒的蛋白外壳,暴露出HBcAg,以已知的抗-HBc用酶标法可检测HBcAg,HBcAg阳性表示HBV在体内复制,反映血清中Dane颗粒数量与DNA多聚酶关系密切,抗HBc包括抗HBc总抗体,抗HBcIgM和抗HBclgG,抗HBc出现于急性乙型肝炎的急性期,恢复后可持续数年或更长,滴度则逐渐下降,慢性HBV感染者,抗HBc持续阳性,单项抗HBc阳性表示过去可能感染过HBV,须与其他标志结合起来判断,分别测抗HBcIgM和HBcIgG更有意义,急性乙肝患者抗IgM呈高滴度阳性,特别对于HBsAg已转阴性的患者(“窗口期”),抗HBclgM阳性可确诊为急性乙肝,抗HBcIgG出现时间较迟于HBclgM,主要见于恢复期和慢性感染。D.前S1,前S2和PHSA受体(与多聚人血清白蛋白结合的能力)均为HBV的外壳蛋白,其阳性率和滴定度与HBsAg滴度,HBeAg,HBV-DNA呈正相关,可作为HBV感染的新标志,血清中前S1抗体阳性是急性乙型肝炎早期诊断指标,因抗-前S1在乙肝潜伏期出现,前S2抗体在病毒复制终止前出现,故血清中抗-前S2是肝炎恢复期的指标。②病毒标志:A.HBV-DNA的检测:应用DNA分子杂交和PCR技术测定,HBV-DNA阳性表示体内有HBV复制,对本病确诊和抗病毒药物疗效考核有参考意义。B.DNA多聚酶的检测:为HBCAg核心成分,DNA多聚酶(DNAP)阳性为HBV存在的直接标志之一,并表示体内病毒在复制。
(3)丙型肝炎:目前HCV体外培养系统还没建立,还不知道HCV抗原的全部免疫学特征,并由于病毒变异和血清标志水平低微,故HCV的检测困难,血清抗原低于现行方法的可检出水平,只能检出抗体。①抗HCV检测:血清中出现HCV抗体可诊断为HCV感染,现在抗-HCV试剂分别来自各个基因片段,存在着不同的敏感性和特异性,亦可能出现假阳性或假阴性,如抗体阳性不能区分是现症感染或是既往感染,不能确定感染已痊愈还是仍携带病毒具有传染性,故对每一检测报告的解释,需要密切联系临床,并要熟悉各种试剂的特点,意义,价值和限制,判定发生困难时,还须用PCR法检测HCV-RNA来确定。②HCV-RNA检测:检测血清抗体不是病毒血症的直接证据,近年来采用反转录RNA PCR检测血中HCV-RNA特异性强,敏感性高,阳性出现早,应用较广,可检测组织和体液中RNA,但操作程序较复杂,技术要求严,检测成本高,只限于有条件实验室进行研究。
⑷丁型肝炎:HDV是缺陷性病毒,只能依附HBV感染而复制和表达,而丁型肝炎无特殊临床特征,遇下列情况应考虑:HBsAg携带者急性肝炎发作,急性肝炎有双相转氨酶升高,乙型慢性活动性肝炎但无HBV复制,原有乙肝合并重型肝炎或肝衰竭,主要诊断根据血清内病毒RNA,HDAg,抗HDV抗体和肝组织内HDAg和病毒RNA测定,但以血清学方法测抗原和抗体最普通。①HDAg:当患急性肝炎时,血清HDAg出现于潜伏期后期和急性期早期,以后很快消失,慢性感染时,用RIA或EIA的检出率极低,但用免疫印渍法测定仍可检出,或当抗HDV出现后转阴,但肝脏内持续有HDAg。②抗HDV:分别测定HDV-IgM和抗HDV-IgG,急性HDV感染时,临床症状出现数天后,抗HDV-IgM出现阳性,一般持续2~4周,抗HDV-IgG随后阳性,二者抗体的滴度一般不高,慢性HDV感染时,抗HDV-IgM持续阳性,并伴有高滴度的抗HDV-IgG,测定HDV-IgM不仅有助于早期诊断,其滴度的下降和增高,往往表示疾病缓解或进展。③HDV-RNA:用分子杂交技术,核酸印迹试验或PCR法可测定血清和肝脏内病毒核酸的存在。
⑸戊型肝炎:①粪便病毒检测:从潜伏末期和急性期初期的患者粪便中,急性和恢复期血清处理后,可用免疫电镜(IEM)检测到27~34nm病毒样颗粒。②特异性抗体测定:患者急性期血清内含有高滴度的IgM抗体,在恢复期患者血清内可测出低水平的IgG抗体。B型超声诊断对判断肝硬化,胆道异常,肝内外占位性病变有参考价值,肝活检对确定弥漫性肝病变及区别慢性肝炎临床类型有重要意义。